Assainissement et régénération des plantes d'Agrumes par l'Embryogenése somatique à partir de la culture de stigmate et style

Abstract

L’embryogenèse somatique issue de la culture in vitro de style et stigmate est l’une des méthodes les plus efficaces dans la régénération de la plupart des espèces d’agrumes du genre Citrus, sans l’induction de la variation somaclonale. En outre, elle s'avère très efficace dans l’élimination des plus importantes maladies virales et de types virales affectant les agrumes. Cette technique a été appliquée sur 35 génotypes de différentes espèces de la collection nationale des agrumes, ([Citrus sinensis (L.) Osbeck, C. limon (L.) Burm, C. reticulata Blanco, C. paradisi Macfad, C. reshni Hort. ex Tan., C. jambhiri Lush et C. maxima (Burm.) Merrill]). Les génotypes sources de fleurs, ont été testés pour la présence des principaux virus et virus similaires par l’utilisation de techniques biologiques, sérologiques et moléculaires. La plupart des génotypes ont été infectés principalement par des virus et viroïdes. Des pistils ont été mis en culture in vitro pour l’obtention d’embryons somatiques. Les cals se sont formées à la base du style. L’embryogénèse survient 38 à 150 jours après la culture initiale. L’Acclimatation in vivo des plantules régénérées a été réalisée par un greffage sur porte greffe. Après l’évaluation de l’état sanitaire, aucun virus, viroïde et virus similaires présents dans les plants mère n’a été détecté dans les plants régénérés par l’embryogénèse somatique. Afin de vérifier la stabilité génétique des plantes régénérées, une quinzaine de régénérants ont été choisis au hasard parmi différents génotypes pour l’évaluation de la variation somaclonale par l’analyse d’empreintes génétiques ISSR (inter-simple sequence repeat).