OPTIMISATION DES FACTEURS INFLUENCANT L'ISOLEMENT DE PROTOPLASTES DE POMME DE TERRE

Abstract

Le présent travail a porté sur l’optimisation des facteurs qui influencent l’isolement de prpotoplastes issus de cals et de mésophyte foliaires de vitro plants de la pomme de terre. Malgré que la réaction de tous les type d’explants en présence de différentes balances hormonales ait été observée, l’intensité de la callogénèse varie en fonction du milieu et du type d’explants. Les meilleurs cals ont été obtenus avec les entre noeuds sur T3 (2.4D/BAP=2 Les mésophiles foliaires et les cals d’entre noeuds de vitro plants de la G1 présentent des exigences différentes en condition d’isolement de protoplastes. En effet, les concentrations optimales en agent osmotique et en enzyme de macération ne sont pas les même pour les deux source de protoplastes. De plus, le mésophile foliaire s’avère être la meilleure source puisqu’il donne des protoplaste plus stables La dernière étape de l’isolement de protoplastes est la purification de la suspension issue de mésophyle foliaire. Nous avons pu montrer que le gradient discontinu à deux couches de saccharose 19/30% donne une meilleure séparation de débris des protoplastes et donc un meilleur niveau de purification.